Fluorometric protein quantitation assay-盟基生物科技股份有限公司

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Protein Analysis
Protein Quantitation
Fluorometric protein quantitation assay

Protein Quantitation

Fluorometric protein quantitation assay

Protein Quantitation

Fluorometric protein quantitation assay

AccuOrange蛋白質定量套組

一、產品介紹

進行任何與蛋白質相關試驗時，例如：SDS-PAGE、protein engineering、Western、ELISA與Mass等，需要一致的蛋白質濃度規格才能控管實驗的品質，為相當重要的分析參數之一，不論是在生化、生物技術、醫學分析、製藥、食品或化妝品工業等，蛋白質定量為基本的例行性程序。而定量蛋白質的方法有許多，每一種方法皆有其特點與應用，例如：(1) 凱氮法：分析結果雖為最精確但操作複雜，不適用於大批樣品的測試，為分析化學與食品分析常見之蛋白定量方法。(2) 雙縮尿素法，其操作簡單且結果之線性佳，但靈敏度差、樣品需求量大且測量範圍窄，因此在科研上的應用備受限制。(3) 科研上常以測光度法 (photometric)進行蛋白質定量，可藉由已知濃度的蛋白質標準品之吸光值，來測定未知濃度之蛋白質樣本（表一）。Biotium為全球知名螢光染劑製造商，Biotium所生產的試劑獲得許多國際知名大廠認可，例：Sigma-Aldrich、BioRad、Qiagen、BD Biosciences與EMD Millipore等，並與許多學術研究人員合作開發新一代的螢光技術，來滿足研究人員的不同需求。Biotium針對蛋白質定量研發出AccuOrange蛋白定量套組。

表一：AccuOrange對不同化學物質之耐受性

化合物	最高承受濃度(final con. in assay)
SDS	0.0001
Triton X-100	Below 0.001%
Tween 20	Below 0.001%
CHAPS	Below 0.001%
Sodium deoxycholate (DOC)	Below 0.001%
Urea	10 mM
DTT	100 mM
bME	0.001
Ammonium sulfate	1 mM
Sodium azide	2 mM
Imidazole	50 mM
DNA	10ug/mL
EDTA	1mM
Sucrose	10 mM (0.34%)
Glycerol	0.01
PBS	0.02X
NaCl	1 mM
CaCl2	0.01 mM
MgCl2	0.2 mM
ZnCl2	0.2mM
Tris	1 mM
Glycine	100 mM
Amino acids	10 ug/mL

二、產品說明

AccuOrange蛋白定量套組為高度敏感型螢光分析試劑，可於96孔盤中定量已純化好的蛋白質 (Ex/Em=480/598 nm)。其偵測蛋白濃度範圍為0.1-15ug/ml。比起傳統定量方法如BCA、Bradford或Lowry蛋白定量分析，AccuOrange蛋白定量套組之敏感性更佳，此外，其線性以及再生性皆更優異。AccuOrange蛋白定量套組可顯示在不同蛋白質之間的最小變異性，且螢光訊號穩定長達16小時；其受測樣本不論為純化蛋白或抗體皆適用，客製化抗體而其適用機型為AccuLiteTM470 Mini Fluorometer。需特別注意的是，AccuOrange對鹽類、緩衝液、detergent或是其他化學物質都有不同程度的耐受性（表二）。

表二：比較不同蛋白質定量分析

蛋白質定量種類	偵測範圍	偵測方式	與reducing agent是否相容	與detergent是否兼容	訊號穩定	其他
AccuOrange	0.1-15 ug/mL	螢光(480/598nm)	V	X	X（長達16hr）	高線性
NanoOrange	0.1-10 ug/mL	螢光(470/578nm)	V	X	X（長達16hr）	非線性
Modified Lowry	1-1500 ug/mL	可見光(750nm)	X	X	-	非線性
BCA	20-2000 ug/mL	可見光(562nm)	X	V	X	高線性
Bradford (Commassie)	50-500 ug/mL	可見光(595nm)	V	X	X	非線性
Pierce 660nm	50-2000 ug/mL	可見光(660nm)	V	V	-	非線性
A280	50-2000 ug/mL	可見光(280nm)	-	-	-	蛋白差異性高；核酸汙染影響結果

三、產品特色

1. 高靈敏度：可偵測蛋白濃度範圍0.1-15 ug/mL
2. 蛋白之間差異小
3. 高線性結果
4. 螢光訊號穩定長達16小時
5. 可使用於含有reducing agent、nucleic acid、amino acid與imidazole之蛋白樣品

四、實驗論證

AccuOrange比NanoOrange有更佳的線性與再現性

利用BSA標準溶液做為測試樣本並進行三重複，分別參照AccuOrange與NanoOrange之建議步驟進行蛋白定量分析。不論是在BSA濃度測試範圍從0-1.5 ug/ml或0-15 ug/ml，皆可發現AccuOrange比NanoOrange有較低的的曲線結果，且三重複的再現性佳。

五、保存條件

室溫保存長達至少一年

六、訂購資訊

貨號	品名	包裝
30071-T	AccuOrange Protein Quantitation Kit	200 assays
30071	AccuOrange Protein Quantitation Kit	2000 assays

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