二、服務特色
1. 免費密碼子優化 (Codon Optimization)基因的密碼子在不同物種間有密碼子使用偏移 (codon usage bias) 的現象,導致實驗中以原核生物系統表達真核生物蛋白質時,表達量時常不符預期。另外,有些基因序列的重複性太高,或片段中GC比例太高,導致蛋白轉錄效率低落。以上現象可透過密碼子優化,調整基因的DNA序列 (胺基酸序列相同),讓基因在不同系統維持高度表達效率。
密碼子優化是針對特定生物體使用首選密碼子的方法。目的是避免生物體內使用率低的稀有密碼子、調整GC含量、減少基因轉錄後mRNA的二級結構,去除不利於高效表達的序列,可有效地優化複雜序列,以顯著提高蛋白質表達水平。密碼子優化服務是對標準基因合成服務的補充。密碼子優化通常綜效評估以下多重因素:
✓ Cryptic splice sites
✓ Poly(N)
✓ Repeats
✓ RNA secondary structures
✓ Killer sequences
✓ Internal RBS sites
✓ GC content
2. 可指定任何載體
全基因合成服務可指定建構於任何載體,著實省下自行克隆的時間。
1. 預設克隆載體: pUC57。
2. 常見表達載體: 提供超過150種常見表達載體供您選擇。(分頁列表)
3. 客戶自行提供載體: 由客戶提供載體 (至少5ug質體)。
3. 可指定克隆使用的限制酶切位
依據您的實驗需求 (如其他克隆實驗),可以指定限制酶切位,並在合成基因同時合成兩端限制酶切位序列 ; 指定載體時建議一併指定限制酶切位(序列)確保基因序列in-frame,可正常表達重組蛋白。
* 若不指定載體及限制酶切位,一律使用 EcoRV平端接入pUC57載體。
此外,更可以同源重組方式將基因無痕接入載體的任何位置,而不需遷就限制酶切位進行克隆,此舉更能發揮完全客製化分子克隆的精隨。
4. 保證合成之基因序列100%正確
基因序列合成由Oligo合成開始至片段組合成完整基因,全程以一站式平台進行,後續經Sanger’s sequencing定序確保所合成之基因序列,每一個鹼基都與客戶需求相同,以達100%序列正確性。另外,再以限制酶切電泳驗證基因是否精準克隆至載體正確位置。雙重QC保證交付的質體所含基因序列100%正確。