Knockin & Cell line Development-CRISPR Services (基因編輯服務)-盟基生物科技股份有限公司

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Knockin & Cell line Development

Knockin & Cell line Development

CRISPR cell line

Knockin & Cell line Development

以核轉染法將CRISPR/Cas9系統的gRNA載體(含Cas9)與攜帶目標點突變的Donor共同轉入細胞中,在gRNA和Cas9複合物造成目標位點DNA雙股斷裂後,細胞以Donor作為模板進行同源重組修復(HDR),將目標點突變重組到基因組目標位點。再利用抗生素進行篩選後挑取Single cell clone,透過目標位點擴增及定序驗證篩選出成功點突變的Single cell clone。


一、服務介紹
1.  Knockin 策略
僅Knockin外來基因片段


Knockout特定基因同時Knockin外來基因片段



2. Knockin gRNA plasmids : 雙 gRNA/Cas9 一體化載體 + Donor載體



3. Knockin 應用案例 
攜帶嵌合抗原受體(CARs)的T細胞可以介導腫瘤排斥反應,是治療B細胞惡性腫瘤的有效方法。透過CRISPR-Cas9技術,在T細胞中,利用Donor載體同源重組將具有CD19特異性的CAR片段取代TRAC基因,不僅可以在人類週邊血T細胞中獲得均勻的CAR表達,還可以增強T細胞的免疫應答能力。
CRISPR/Cas9標靶CAR基因整合入TRAC位點, 1928z是具有CD19特異性的CAR片段。 TCR/CAR 流式細胞儀結果, Cas9,gRNA 和donor同時存在時,4天後能偵測到Knockin蛋白CAR的表達。



4. Knockin Cell line 服務詳情
細胞類型 腫瘤細胞、常規細胞株、IPS/ES等各類細胞
服務類型 螢光/蛋白標籤等
交付規格 Cell Pool/ Single cell clone
交期 依方案評估
客戶提供資訊 細胞株名稱, 基因名稱 (NCBI基因代號)