Point Mutation & Cell line Development-CRISPR Services (基因編輯服務)-盟基生物科技股份有限公司

客製化抗體-盟基生物科技股份有限公司

Point Mutation & Cell line Development

Point Mutation & Cell line Development

CRISPR cell line

Point Mutation & Cell line Development

以核轉染法將CRISPR/Cas9系統的gRNA載體(含Cas9)與攜帶目標點突變的Donor共同轉入細胞中,在gRNA和Cas9複合物造成目標位點DNA雙股斷裂後,細胞以Donor作為模板進行同源重組修復(HDR),將目標點突變重組到基因組目標位點。再利用抗生素進行篩選後挑取Single cell clone,透過目標位點擴增及定序驗證篩選出成功點突變的Single cell clone。


一、服務種類

1. Point Mutation 策略
單一 gRNA/Cas9 一體化載體 + Oligo 載體


2. Point Mutation gRNA plasmids


3. 應用案例
用於修復A79V-hiPSC點突變的gRNA序列和ssODN。
(A) 突變位點附近的基因組序列:紅色的T是需要修正的核苷酸;黃色的是sgRNA辨識位點,加粗的AA是Cas9的切割位點;粉紅色的是正反向引子。
(B) Donor oligo序列, 綠色的C是修正後的核苷酸。


4. 服務詳情
 
細胞類型 腫瘤細胞、常規細胞株、IPS/ES等各類細胞
服務類型 RNP法、質體抗性法、單鹼基編輯器、AAV-Donor法
交付規格 Cell Pool/ Single cell clon
交期 依方案評估
客戶提供資訊 細胞株名稱, 基因名稱 (NCBI基因代號), 點突變位點