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Antibody Generation
Protein Expression(E. coli、HEK293 & CHO)
Afucosylated Antibody Expression
Recombinant antibody production
VHH Antibody Discovery
原廠服務手冊下載
一、服務介紹 (品牌:Biointron)VHH (VH derived from heavy chain antibodies)來自於HcAb (heavy chain antibody)上的可變區,構型有別於一般IgG或其衍生的抗體形式(Figure 1),而駱駝科動物是自然界中,會生產 heavy chain antibody 的物種之一。
VHH特色
✓ 分子量很小,只有15KDa
✓ 溶解度高
✓ 結構穩定
✓ 易於生產
✓ 可識別不常見或隱藏的epitope
✓ 容易進入酵素的空腔或活性區
✓ 可穿透血腦屏障
✓ 適合應用於藥物開發,例如雙抗藥物、細胞治療或delivery system
二、服務應用
VHH可應用於學術研究、臨床診斷、治療性抗體開發與細胞治療,應用方面極廣,可以說是抗體界的明日之星!
Biointron在羊駝單株抗體開發已有超過 10 年的經驗,根據不同的實驗規模與需求,可以提供兩種抗體篩選平台- Animal Immunization & Naïve Library Screening ,客戶可以選擇最符合需求的方式進行,比較優缺點如下方表格:羊駝抗體篩選平台 特色比較 Animal immunization Naïve library screening 羊駝物種 Alpaca Alpaca 時間(不含抗原製備) 4~5 months 6~10 weeks (勝!) 抗體親和力 較佳 (勝!) 較差~ 中等
三、篩選平台- Animal immunization
每一隻羊駝只用於單一項目,以成熟的phage display 技術與高通量篩選平台,為客戶提供最專業的客製化抗體生產服務。
1. 服務保證
✓ 自有羊駝養殖場,每隻羊駝只使用於一個項目,絕不重複
✓ 最少提供20株特異性抗體序列
✓ 獨家的高通量篩選平台,提供多樣性&高產能
✓ 抗體品質: in vivo等級重組抗體 (內毒素<1EU/mg )
✓ 成功率高 : 目前累積超過99%的成功經驗
2. 服務流程
3. 案例分享
Anti-human CDCP1 VHH antibody screening:
動物免疫後利用高通量篩選平台,將528 個clones 用ELISA 的方式篩選,最終挑選出194株特異性抗體序列,陽性篩選比例高達36.74%。
四、篩選平台- Naïve library screening
使用已構建好的naïve VHH phage library,不需要經過動物免疫,直接進入biopanning & screening 步驟,快速得到羊駝抗體。
1. 服務優勢
✓ 交期短:跳過動物免疫直接進行抗原篩選(只需約6~10 週)
✓ 方案彈性佳:可自行選購定序與生產的抗體個數
✓ Library多樣性大:容量約10¹⁰~10¹²
✓ 成功率高: 目前累計100%的成功經驗
2. 服務流程Antibody Discovery by Phage Display Specifications Timeline Deliverables 1.1 Antigen preparation A. Gene synthesis and carrier construction
B. Protein Expression Evaluation
C. Protein expression and purification2-3 weeks 1. Expression plasmid
2. Purified protein1.2 Immune library panning and screening against antigen A. Screening of the naïve Alpaca VHH library(3 rounds of biopanning)
B. Screening and validation by ELISA until at least 5 different clones are identified3-4 weeks 3. Progress report 1.3 VHH-hFc construction, expression, and purification A. Phage DNA extraction and antibody sequencing
B. Expression the selected clones by mammalian cell2 week 4. Progress report
5. DNA sequence of the best clones
6. 1mg Antibody per clone
2. 案例分享
Anti-chemokine VHH antibody in the antibody discovery:
從羊駝天然庫中利用高通量篩選平台,用ELISA 的方式篩選,最終挑選出22株特異性抗體序列,經細胞功能驗證部分抗體具有活性。